本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體為一種bace1酶活性的納米材料的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、阿爾茨海默病（alzheimer’s?disease，ad）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的退行性病變，主要發(fā)生在老年或老年前期。疾病的主要特征包括進(jìn)行性的認(rèn)知功能障礙和行為損害。
2、bace1酶是β-分泌酶，它在阿爾茨海默?。╝d）的病理過程中起著關(guān)鍵作用。它是β-淀粉樣蛋白（aβ）生成的關(guān)鍵酶，通過切割β-淀粉樣前體蛋白（app）生成aβ。因此，抑制bace1酶的活性被認(rèn)為是治療ad的一種潛在策略。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明目的在于提出一種抑制bace1酶活性的納米材料的制備方法，通過干細(xì)胞外泌體包載川陳皮素獲得具有抑制bace1酶活性的納米材料，為治療ad提供新的選擇。
2、有鑒于此，本發(fā)明的方案為：
3、本發(fā)明的第一個(gè)方面在于，提出一種抑制bace1酶活性的納米材料的制備方法，步驟包括：
4、獲取干細(xì)胞外泌體；
5、向外泌體中加入川陳皮素溶液，在脈沖電場條件下進(jìn)行電穿孔獲得負(fù)載有川陳皮素的外泌體，即抑制bace1酶活性的納米材料。
6、進(jìn)一步地，所述電穿孔過程的脈沖長度為1?ms；和/或，所述電場強(qiáng)度為1000-2500v/cm。
7、進(jìn)一步地，所述電穿孔過程時(shí)間為10-120s。
8、進(jìn)一步地，所述外泌體濃度為0.1-0.3mg/ml；和/或，所述川陳皮素溶液濃度為2.5-50?μg/ml。
9、進(jìn)一步地，所述干細(xì)胞為脂肪干細(xì)胞。
10、進(jìn)一步地，所述干細(xì)胞外泌體由干細(xì)胞上清液經(jīng)預(yù)離心除去細(xì)胞碎片、依次經(jīng)由0.2μm?孔徑的濾膜、500?kda?的超濾膜及0.1μm?的濾膜過濾后濃縮得到。
11、本發(fā)明的第二個(gè)在于，提出第一個(gè)方面所述制備方法獲得的抑制bace1酶活性的納米材料。
12、進(jìn)一步地，所述外泌體粒徑為30-150?nm；每300μg外泌體中所述川陳皮素的負(fù)載量為5-10μg。
13、本發(fā)明的第三個(gè)在于，提出一種抗ad藥物組合物，包括第一個(gè)方面所述的抑制bace1酶活性的納米材料，及藥學(xué)上可接受的載體。
14、本發(fā)明的第三個(gè)在于，提出第一個(gè)方面所述抑制bace1酶活性的納米材料在制備抗ad藥物中的應(yīng)用。
15、相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：
16、本發(fā)明所述制備方法通過干細(xì)胞外泌體在脈沖電場條件下進(jìn)行電穿孔實(shí)現(xiàn)川陳皮素的包載，獲得具有抑制bace1酶活性的納米材料，該納米材料具有較高的安全性及bace1酶抑制能力，為治療ad提供新的選擇。
1.一種抑制bace1酶活性的納米材料的制備方法，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述電穿孔過程的脈沖長度為1?ms；和/或，所述電場強(qiáng)度為1000-2500v/cm。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述電穿孔過程時(shí)間為10-120s。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述外泌體濃度為0.1-0.3mg/ml；和/或，所述川陳皮素溶液濃度為2.5-50?μg/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述干細(xì)胞為脂肪干細(xì)胞。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述干細(xì)胞外泌體由干細(xì)胞上清液經(jīng)預(yù)離心除去細(xì)胞碎片、依次經(jīng)由0.2μm?孔徑的濾膜、500?kda?的超濾膜及0.1μm?的濾膜過濾后濃縮得到。
7.權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)所述制備方法獲得的抑制bace1酶活性的納米材料。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抑制bace1酶活性的納米材料，其特征在于，所述外泌體粒徑為30-150?nm；每300μg外泌體中所述川陳皮素的負(fù)載量為5-10μg。
9.一種抗ad藥物組合物，包括權(quán)利要求7所述的抑制bace1酶活性的納米材料，及藥學(xué)上可接受的載體。
10.權(quán)利要求7所述抑制bace1酶活性的納米材料在制備抗ad藥物中的應(yīng)用。