本發(fā)明屬于中藥,尤其涉及一種金線蓮提取物的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、金線蓮(anoectochilus?roxburghii)為蘭科開(kāi)唇蘭屬珍稀藥用植物,傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為其具有清熱解毒、涼血潤(rùn)燥等功效?,F(xiàn)代研究表明,金線蓮含有多糖、黃酮類(如蘆丁、槲皮素)、多酚(如沒(méi)食子酸)、生物堿(如金線蓮苷)及氨基酸等多種活性成分,具有顯著的抗氧化、抗炎、促進(jìn)膠原蛋白合成及保濕等作用,因此在功能性護(hù)膚品開(kāi)發(fā)中備受關(guān)注。但是目前金線蓮的提取方法仍存在很多的問(wèn)題,如傳統(tǒng)提取工藝(如水提法、醇提法)受限于金線蓮復(fù)雜的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu),導(dǎo)致多糖、黃酮、生物堿等活性成分溶出率低。例如,水提法雖操作簡(jiǎn)便,但因多糖分子量大、純化困難,易造成有效成分損失;醇提法則因使用有機(jī)溶劑存在環(huán)境污染風(fēng)險(xiǎn),且對(duì)熱敏性成分破壞顯著。此外,不同組織部位(根、莖、葉)的成分差異顯著,現(xiàn)有工藝缺乏針對(duì)性優(yōu)化,導(dǎo)致提取物中關(guān)鍵活性物質(zhì)含量波動(dòng)較大,影響產(chǎn)品功效穩(wěn)定性。金線蓮提取物成分復(fù)雜,傳統(tǒng)柱色譜、樹(shù)脂吸附等方法存在流程冗長(zhǎng)、成本高昂、活性不穩(wěn)定等問(wèn)題,例如,多糖提取需通過(guò)脫蛋白、脫色等多步處理,蛋白質(zhì)殘留會(huì)直接影響多糖活性;而生物堿類成分的分離則需依賴酸堿調(diào)節(jié)和有機(jī)溶劑萃取,易造成產(chǎn)物純度不足。如何能夠更好的發(fā)揮金線蓮的功能,起到更好的保濕護(hù)膚、抗皺、舒緩等效果,仍需進(jìn)一步研究。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、有鑒于此,本發(fā)明的目的在于提供一種金線蓮提取物的制備方法及其應(yīng)用。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
3、本發(fā)明提供一種金線蓮提取物的制備方法,所述制備方法包括將金線蓮多肽和稠膏按照1:3~7的質(zhì)量比混合;
4、所述金線蓮多肽的制備方法包括以下步驟:
5、1)將金線蓮的花和/或葉與水按照質(zhì)量比1:5-10混合,30~40℃保溫40~80min后,加入纖維素酶進(jìn)行第一酶解,得到初步酶解液;
6、2)調(diào)節(jié)初步酶解液的ph,加入中性蛋白酶進(jìn)行第二酶解后,離心,將上清液超濾,干燥,得到金線蓮多肽;
7、所述稠膏的制備方法包括以下步驟:
8、s1.使用液氮速凍破壁金線蓮的根和/或莖,得到金線蓮碎末;
9、s2.在45~55℃的環(huán)境中,用ph=3~5,60%~90%體積濃度的乙醇溶液提取金線蓮碎末40~80min,分離,得到上清液1和沉淀1;
10、s3.在35~45℃的環(huán)境中,用ph=5~6,30%~50%體積濃度的乙醇溶液提取沉淀1,提取時(shí)間為40~80min,分離,得到上清液2和沉淀2;
11、s4.在20~30℃的環(huán)境中,用水提取沉淀2,提取時(shí)間為40~80min,分離,得到上清液3和沉淀3;
12、s5.將上清液1、上清液2和上清液3合并,濃縮,得到相對(duì)密度為1.30~1.40的稠膏。
13、優(yōu)選的,步驟1)所述纖維素酶的質(zhì)量為粉碎的金線蓮的花和/或葉質(zhì)量的2%~4%;
14、所述第一酶解的溫度為40~70℃;
15、所述第一酶解的時(shí)間為60~120min。
16、優(yōu)選的,步驟2)所述ph為6~8;
17、中性蛋白酶的質(zhì)量為粉碎的金線蓮的花和/或葉質(zhì)量的2%~4%;
18、所述第二酶解的溫度為40-55℃,所述第二酶解的時(shí)間為20~60min。
19、優(yōu)選的,步驟2)所述離心的轉(zhuǎn)速為5000~10000rpm;離心的時(shí)間為10~20min;
20、所述超濾為收集分子量≤1kda的多肽;
21、所述干燥包括真空冷凍干燥。
22、優(yōu)選的,步驟s2所述乙醇溶液與金線蓮碎末的體積質(zhì)量比為8~12ml:1g。
23、優(yōu)選的,步驟s3所述乙醇溶液與沉淀1的體積質(zhì)量比為8~12ml:1g。
24、優(yōu)選的,步驟s4所述水與沉淀2的體積質(zhì)量比為8~12ml:1g。
25、本發(fā)明提供所述制備方法制備得到的金線蓮提取物。
26、本發(fā)明提供所述金線蓮提取物在制備化妝品中的應(yīng)用。
27、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下有益效果:
28、本發(fā)明提供一種金線蓮提取物的制備方法,通過(guò)限定將金線蓮多肽和稠膏復(fù)配,大幅度提高金線蓮提取物的使用效果,增強(qiáng)了金線蓮提取物的抗氧化性、保濕性和抗炎能力,同時(shí)限定多肽的來(lái)源和制備方法,保證多肽的功能較好,且分子量較小,保證透皮率,且能與稠膏相配合發(fā)揮更好的作用,還限定了稠膏的制備方法,利用液氮速凍破壁技術(shù)避免關(guān)鍵熱敏物質(zhì)如槲皮素、沒(méi)食子酸等分解,采用動(dòng)態(tài)逆流梯度提取技術(shù),結(jié)合三級(jí)溶劑極性(乙醇-水)與ph/溫度梯度調(diào)控,實(shí)現(xiàn)黃酮、多酚、多糖、氨基酸等不同極性成分的定向分離,大幅度增加了提取效率,使得與多肽的復(fù)配效果更好。本發(fā)明很好地解決了傳統(tǒng)金線蓮提取工藝中活性成分損失、功效單一等核心問(wèn)題,增強(qiáng)了金線蓮提取物的保濕舒緩、抗氧化、緊致抗皺等效果。
1.一種金線蓮提取物的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括將金線蓮多肽和稠膏按照1:3~7的質(zhì)量比混合;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟1)所述纖維素酶的質(zhì)量為粉碎的金線蓮的花和/或葉質(zhì)量的2%~4%;
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟2)所述ph為6~8;
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,步驟2)所述離心的轉(zhuǎn)速為5000~10000rpm;離心的時(shí)間為10~20min;
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟s2所述乙醇溶液與金線蓮碎末的體積質(zhì)量比為8~12ml:1g。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟s3所述乙醇溶液與沉淀1的體積質(zhì)量比為8~12ml:1g。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟s4所述水與沉淀2的體積質(zhì)量比為8~12ml:1g。
8.權(quán)利要求1~7任意一項(xiàng)所述制備方法制備得到的金線蓮提取物。
9.權(quán)利要求8所述金線蓮提取物在制備化妝品中的應(yīng)用。